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你问“沃”答︱肾穿组织的最佳制片方法如何操作?

2022.03.11

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就肾脏制片的质量而言,病理工作者比较公认的标准为:

1、2μm切片厚度,切片无折叠及刀痕,切片完整,薄如蝉翼。

2、染色清晰,透明性好,对比鲜明。免疫组化或免疫荧光定位准确。

那么,如何操作才能制出高质量的肾穿组织制片?今天,为大家带来肾穿组织的最佳制片方法,我们一起来看看吧!

具体方法及步骤

1、取材:穿刺抽取肾组织,颜色偏暗红,相对密度较大。放大镜下可见到暗红色的髓质和颜色稍淡的肾皮质(皮质中可见到呈模糊的小红点结构的肾小球),放入固定液中,可沉于瓶底。

2、固定:PB-FA固定液①,既有FAA固定液的优点,也可以避免组织中红细胞的溶解。

3、脱水

(1)常温80%乙醇(60min)

(2)95%乙醇Ⅰ(60min)

(3)95%乙醇Ⅱ(30min)

(4)无水乙醇Ⅰ(20min)

(5)无水乙醇Ⅱ(20min)

(6)无水乙醇Ⅲ(20min)

4、透明

(1)正丁醇Ⅰ(30min)

(2)正丁醇Ⅱ(30min)

(3)正丁醇Ⅲ(30min)

5、浸蜡

(1)石蜡Ⅰ(45~50℃:40min)

(2)石蜡Ⅱ(56~58℃:50分钟)

(3)石蜡Ⅲ(56~58℃:60分钟)

6、包埋:韧性较强的石蜡。

7、切片:2~3μm

8、染色:普通HE染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等。


【参考文献】

1、病理技术大讲堂1001问-病理技术操作疑难点解惑答疑. 席越,陈军主编.人民卫生出版社



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